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核糖核酸酶a-白蛋白偶联物的制备、结构分析及生物活性：四偶联或PEG作为连接物
2025/01/08Preparation, structural analysis and bioactivity of ribonuclease A-albumin conjugate: tetra-conjugation or PEG as the linker
摘要
核糖核酸酶A （RNase A）是一种对肿瘤细胞具有细胞毒性作用的治疗酶。其临床应用受半衰期短、稳定性不足的限制。白蛋白的偶联可以克服这一限制，但会显著降低RNase a的酶活性。本文提出了三种策略来制备RNase a -牛血清白蛋白（BSA）偶联物。分别用Sulfo-SMCC（短双功能连接物）和mal-PEG-NHS（双功能连接物）制备了R-SMCC-B（4个RNase a与1个BSA连接的共轭物）和R-PEG-B（单共轭物）。用Mal-PEG-NHS和十六烷基胺（HDA）制备单偶联物R-HDA-B，其中HDA与BSA结合。PEG连接器可以延长RNase A和BSA之间的距离。相反，在R-SMCC-B中，4个RNase A位于BSA上。R-SMCC-B的K(m)最低，相对酶活性和K(cat)/K(m)最高。推测RNase A在R-SMCC-B中的四价相互作用可以增加其与底物的结合亲和力。此外，从R-HDA-B中缓慢释放BSA可能会增加R-HDA-B的酶活性。我们的研究有望为开发具有高治疗潜力的蛋白-白蛋白偶联物提供策略。
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